Prinċipju ta 'Oligo Synthesizer
Fl-oqsma tal-bijoloġija molekulari u r-riċerka tal-ġenetika, il-kapaċità li jiġu sintetizzati d-DNA għandha rwol kruċjali.Is-sintesi tad-DNA tinvolvi l-produzzjoni artifiċjali ta 'molekuli tad-DNA billi tirranġa nukleotidi f'ordni speċifika.Biex jinkiseb dan, ix-xjentisti jiddependu fuq għodda qawwija magħrufa bħala sintetizzatur tal-oligonukleotidi, magħruf ukoll bħala sintetizzatur tad-DNA.
Sintetizzatur tal-oligonukleotidi huwa strument sofistikat li awtomatikament jissintetizza molekuli qosra tad-DNA msejħa oligonukleotidi.Dawn il-fergħat qosra ta 'DNA huma tipikament 10 sa 100 nukleotidi fit-tul u huma elementi essenzjali f'varjetà wiesgħa ta' applikazzjonijiet inklużi reazzjoni katina tal-polimerażi (PCR), sintesi tal-ġeni, inġinerija ġenetika u sekwenzar tad-DNA.
Is-sintetizzaturi ta 'oligonukleotidi joperaw fuq il-prinċipju ta' teknika magħrufa bħalasinteżi ta' fażi solida.Dan il-metodu kien l-ewwel pijunieri mir-rebbieħ Nobel Dr Marvin Caruthers fis-snin sebgħin u ġie rfinat matul is-snin biex itejjeb is-sintesi tas-sekwenzi tad-DNA.Is-sinteżi ta' l-oligonukleotidi titwettaq permezz ta' żieda gradwali ta' residwi tan-nukleotidi mat-tarf 5' tal-katina li qed tikber sakemm is-sekwenza mixtieqa tkun immuntata.Kull żieda tissejjaħ ċiklu ta' sinteżi u tikkonsisti f'erba' reazzjonijiet kimiċi:
Pass 1: De-imblukkar (detritilazzjoni) ---------Pass 2: Akkoppjar ---------Pass 3: Limitu -----------Pass 4: Ossidazzjoni
Dan il-proċess huwa ripetut għal kull nukleotide sakemm tinkiseb is-sekwenza mixtieqa.Għal oligonukleotidi itwal, dan iċ-ċiklu jista 'jeħtieġ li jiġi ripetut diversi drabi biex tiġi sintetizzata s-sekwenza kollha. Il-kapaċità li tikkontrolla b'mod preċiż kull pass taċ-ċiklu ta 'sinteżi hija kritika għal sintetizzatur ta' oligonukleotidi.Ir-reaġenti użati, bħal nukleotidi u attivaturi, jeħtieġ li jkunu ta 'kwalità għolja biex jiżguraw sintesi preċiża u effiċjenti.Barra minn hekk, sintetizzaturi jeħtieġu kontroll tat-temperatura ta 'preċiżjoni għolja u kundizzjonijiet ambjentali oħra biex jippromwovu reazzjonijiet ta' akkoppjar mixtieqa u jipprevjenu reazzjonijiet mhux mixtieqa.
Ladarba oligonukleotide jiġi sintetizzat bis-sħiħ, huwa tipikament maqtugħ mis-sostenn solidu u ppurifikat biex jitneħħew kwalunkwe gruppi protettivi jew impuritajiet li jifdal.L-oligonukleotidi purifikati huma mbagħad lesti għal applikazzjonijiet downstream.
L-avvanzi fit-teknoloġija ppermettew l-iżvilupp ta 'sintetizzaturi ta' oligonukleotidi b'rendiment għoli kapaċi li simultanjament jissintetizzaw mijiet jew saħansitra eluf ta 'oligonukleotidi.Dawn l-istrumenti jużaw teknoloġija ta 'sinteżi bbażata fuq mikroarray, li tippermetti lir-riċerkaturi jiġġeneraw malajr libreriji kbar ta' oligonukleotidi għal varjetà ta 'skopijiet ta' riċerka.
Fil-qosor, il-prinċipji wara s-sintetizzaturi tal-oligonukleotidi jduru madwar tekniki ta 'sinteżi ta' fażi solida, li jinvolvu ż-żieda gradwali ta 'nukleotidi fuq appoġġ solidu.Kontroll preċiż taċ-ċiklu ta 'sinteżi u reaġenti ta' kwalità għolja huma essenzjali għal sinteżi preċiża u effiċjenti.Is-sintetizzaturi tal-oligo għandhom rwol vitali fir-riċerka tad-DNA, li jippermettu lix-xjenzati jiġġeneraw oligonukleotidi personalizzati għal varjetà ta 'applikazzjonijiet, li jikkontribwixxu għall-avvanzi fil-bijoteknoloġija u r-riċerka ġenetika.
Ħin tal-post: Awissu-01-2023