Fis-sintesi tipika tad-DNA, RNA u aċidi nuklejċi mhux naturali, il-pass tad-Deprotection and Coupling għandu rwoli kruċjali.
Il-pass ta 'Deprotection huwa li jitneħħa l-grupp DMT fuq l-appoġġ solidu jew il-grupp 5' hydroxyl fuq in-nukleoside preċedenti b'aċidu organiku, u espost il-grupp hydroxyl għall-pass ta' akkoppjar li ġej.L-aċidu trichloroacetic ta '3% fid-dichloromethane jew it-toluene jintuża l-aktar biex iwettaq il-pass ta' deprotezzjoni.Il-konċentrazzjoni ta 'aċidu trichloroacetic u l-ħin ta' deprotection (ħin ta 'deblocking) jiddominaw il-purità tal-prodotti finali.Konċentrazzjoni baxxa u ħin ta 'deblocking insuffiċjenti tħalli grupp DMT mhux reazzjoni, li jnaqqas ir-rendiment u jżid l-impuritajiet mhux mixtieqa.Il-ħin twil ta 'deblocking jista' jwassal id-depurine ta 'sekwenzi sintetizzati, li jiffurmaw l-impuritajiet mhux mistennija.
Il-pass tal-Igganċjar huwa sensittiv għall-kontenut tal-ilma tas-solventi u l-umdità fl-arja.Il-konċentrazzjoni tal-ilma fis-sintesi għandha tkun inqas minn 40 ppm, aħjar inqas minn 25 ppm.Biex iżżomm il-kundizzjoni tas-sinteżi anidruża, is-sinteżi tal-aċidi nuklejċi għandha titwettaq f'ambjent b'umdità baxxa, għalhekk nirrakkomandaw lill-klijent tagħna biex juża l-Tagħmir Maħlul ta' Amidites, li jista 'ħoll il-Phosphoramidite trab jew żejtni f'acetonitrile anidru biex jiġi evitat kuntatt ma' l-arja.
Peress li d-dewweb tal-fosforamiditi huwa aħjar fis-sitwazzjoni mhux tal-ilma, u nases molekulari biex jassorbu l-ilma traċċa fir-reaġenti u l-amidite, jeħtieġ li tipprepara l-Nases Molekulari.Nirrakkomandaw 2 g subsieve għal fliexken tar-reaġent ta '50-250ml, 5g għal fliexken tar-reaġent ta' 250-500ml, 10g għal fliexken tar-reaġent ta '500-1000ml, u 20g għal fliexken tar-reaġent ta' 1000-2000ml.
Id-dewweb tal-fosforamiditi għandu jitwettaq taħt l-atmosfera inerta, u s-sostituzzjoni ta 'reaġenti attivaturi u aċetonitrile għandha tkun lesta fil-ħin.Ir-reaġenti ta 'Capping u Ossidazzjoni għandhom jintużaw kemm jista' jkun malajr, ir-reaġenti miftuħa jagħtu inqas ħajja fuq l-ixkaffa, u inqas attività waqt is-sintesi.
Ħin tal-post: Awissu-09-2022